小鼠存活但卻患病了
為研究RIPK3蛋白RHIM功能域的體內功能，研究人員通過CRISPR－Cas9構建了特定點突變的小鼠模型。免疫共沉澱實驗顯示，點突變後的RIPK3蛋白不能與RIPK1發生相互作用。
為進一步證實該點突變抑制細胞壞死的作用，研究人員在FADD基因敲除小鼠模型中引入該突變。結果發現，本應胚胎致死的小鼠活了下來，並且活到了成年。
章海兵解釋，FADD敲除小鼠在胚胎發育的10天左右時，會因過度細胞壞死而胚胎死亡。而RIPK3的點突變可以挽救FADD敲除導致的小鼠胚胎致死並存活到成年。“這證明，RIPK3蛋白RHIM功能域在體內介導細胞程序性壞死中起關鍵作用”。
值得注意的是，本應胚胎死亡的FADD敲除小鼠雖然因RIPK3點突變活下來了，但卻患有系統性淋巴細胞增生。有趣的是，在FADD敲除小鼠的基礎上，與敲除RIPK3基因相比，RIPK3點突變小鼠的疾病更嚴重了。
“換句話說，FADD敲除基礎上，RIPK3點突變蛋白能介導炎症反應促進小鼠系統性淋巴細胞增生疾病。”章海兵推測，這可能提示，RIPK3觸發的細胞炎症反應是依賴於RIPK3的蛋白骨架，而不依賴於點突變。“因此，RIPK3點突變後，蛋白骨架還在，炎症反應仍會發生，疾病表現更為嚴重。”
兩種蛋白仍有“料”可挖
此外，在以上實驗基礎上，研究人員發現，進一步敲除RIPK1則可以緩解系統性淋巴細胞增生。 |
